淺析Bio-Rad電泳系統(tǒng)之垂直電泳儀的操作流程

　　淺析Bio-Rad電泳系統(tǒng)之垂直電泳儀的操作流程，具體內(nèi)容如下：
　　1、灌膠：把制膠器放在平穩(wěn)的臺面上。保持制膠器干燥，抬起兩側(cè)的羽狀開關(guān)放開卡門，平放，放進(jìn)橡膠墊圈并緊扣。先把厚玻璃平板放入，再放兩側(cè)的墊片，后放入帶凹型的玻璃平板。緊緊合上卡門，同時(shí)按壓兩側(cè)的羽狀開關(guān)聽到“咔嚓”聲音。
　　2、倒分離膠：將配好的分離膠溶液用加樣槍緩慢加入制膠玻板之間,直至液面達(dá)到卡門邊框下緣線處。小心用加樣槍將去離子水沿水平方向沿水平方向沿水平方向沿水平方向加入制膠板中的分離膠液面上，以防止膠液蒸發(fā)并保證膠面平整。聚合大約需要30秒。
　　3、倒?jié)饪s膠：分離膠聚合后，倒掉去離子水，用濾紙吸去殘液。在玻板中加滿濃縮膠溶液，輕輕地插入合適的梳子，梳子的厚面向?qū)嶒?yàn)者，避免產(chǎn)生氣泡。30分鐘后，除去梳子，抬起兩側(cè)的羽狀開關(guān)放開卡門，拿出帶膠的制膠玻板。
　　4、安裝電泳槽：按壓電泳槽中央夾具的開關(guān)使卡門松開，將玻璃夾板放入槽內(nèi)。注意，兩玻璃夾板的凹玻板均應(yīng)與電泳槽內(nèi)芯接觸。如果每次只電泳一塊膠，另一套玻璃夾板必須用提供的有機(jī)玻璃板代替。
　　5、樣品處理：在等待濃縮膠聚合時(shí)，可對樣品進(jìn)行處理，在樣品中按1:1體積比加入上樣緩沖器，在100℃加熱3-5分鐘以使蛋白質(zhì)變性。
　　6、加樣：在外水槽加電泳緩沖液至槽體的一半位置。放正槽體，繼續(xù)加注緩沖液，避免產(chǎn)生氣泡，使內(nèi)槽的水位均超過凹形板的缺口但低于方形板的上沿。用微量加樣器或普通加樣槍在梳井內(nèi)按預(yù)定順序加樣，加樣量通常為10～25μl。
　　7、Bio-Rad電泳系統(tǒng)的電泳：蓋好上蓋，在100—150V的電壓下電1—2小時(shí)，一般濃縮膠電壓80V20~30Min，分離膠120V80Min，到樣品指示劑到達(dá)玻璃板的下緣，關(guān)掉電源。取下玻璃夾板。用刀片或薄板將膠板玻璃橇開，用單面剃刀片將分離膠切掉，將凝膠板的左上角切掉一小角以標(biāo)記樣品順序。